Дихидроетидий

Дихидроетидият (DHE) е често използвана флуоресцентна сонда за откриване на супероксидни аниони. DHE навлиза свободно в клетката и се дехидрогенира в присъствието на вътреклетъчни супероксидни аниони, за да се получи етидиев бромид. Етидиевият бромид се свързва с вътреклетъчните нуклеинови киселини и произвежда червена флуоресценция. Когато нивото на вътреклетъчния супероксиден анион е високо, колкото повече етидиев бромид се произвежда, толкова по-висок е интензитетът на флуоресценция и обратното, толкова по-слаб е интензитетът на флуоресценция. Следователно, той може да се използва за откриване на нивото на вътреклетъчния супероксиден анион.

Кораб със сух лед; Съхранявайте на -20 градуса далеч от светлина за 6 месеца.

Забележка: Горният брой на реакциите е анализиран за 6-система с ямкови плаки.

1. Този продукт е 5 mM дихидроетидиум (супероксидна анионна флуоресцентна сонда) мастербач, който се разрежда в работен разтвор на DHE (обикновено 1-10 μM е достатъчен за експеримента), като се използва подходяща среда или буфер;

2. Измийте нормалните или третирани клетки 1-2 пъти с PBS или други буфери;

3. След отстраняване на промивния буфер, добавете 1 mL работен разтвор на DHE и инкубирайте за 30 минути в инкубатор за клетъчни култури, защитен от светлина;

4. Отстранете работния разтвор на DHE и измийте 1-2 пъти с PBS или други буфери;

5. Тест под съответния инструмент; Самата DHE е синя флуоресценция, Ex е 355 nm, Em е 420 nm; Когато DHE дехидрогенира и се свързва с нуклеинова киселина, той показва червена флуоресценция, Ex е 520 nm, Em е 605 nm.

1. Поради различните видове и свойства на клетките, работната концентрация на сондата и времето за инкубация могат да се регулират по подходящ начин според нуждите на експеримента.

2. Работният разтвор на сондата, промиващият буфер и т.н. трябва да бъдат предварително затоплени и обработени предварително, за да се избегне стимулиране на температурната разлика, засягащо клетките.

3. Флуоресцентните багрила подлежат на закаляване, като процесът трябва да се пази от светлина.

4. Дихидроетидият лесно се окислява във въздуха, избягвайте излагането на въздух колкото е възможно повече, препоръчва се да се съхранява на малки порции и да се избягва повторно замразяване и размразяване.

5. За вашето здраве и безопасност, моля, носете лабораторна престилка и ръкавици по време на работа.

Само за изследователска употреба!

Популярни тагове: дихидроетидий, Китай дихидроетидий производители, доставчици, фабрика