В-клетките на бозайниците се класифицират основно на прогениторни В-клетки, пре-В-клетки, незрели В-клетки, фоликуларни В-клетки, В-клетки на маргиналната зона, В-клетки на паметта, плазмени клетки и други видове.
1. Прогениторни В клетки
Прогениторните В клетки са прародителски клетки с ограничен капацитет за самообновяване, разделени на ранни про-В клетки и късни про-В клетки. По време на ранния про-В клетъчен стадий настъпва DJ пренареждане на тежката верига, докато по време на късния про-В клетъчен стадий настъпва VDJ пренареждане на тежката верига. Тези клетки също експресират маркери, специфични за B-линията, като Thy-1+, Tdt+, B200+ и mb-1+ молекули.
2. Пре-В клетки
Пре-В клетъчният стадий започва с експресията на пре-В клетъчния рецептор (pre-BCR), съставен от μ верига и сурогатни леки вериги (включително VpreB и λ5 протеини, хомоложни на V и C областите на леката верига). Пре-BCR сигнализирането задейства клонална експанзия на В клетки и инхибира по-нататъшното пренареждане на VDJ на тежката верига, осигурявайки алелно изключване. TdT и CD10 са полезни маркери за разграничаване на пре-В клетки от други етапи на развитие на В клетки. Този етап също експресира диференциационни антигени като MHC II, CD19, CD20 и CD24. Пре-В клетките нямат чувствителност към антигени и не проявяват имунни функции.
3. Незрели В клетки
След развитие в костния мозък, пре-В-клетките узряват в незрели В-клетки, които експресират само пълен мембранно-свързан IgM (mIgM) на тяхната повърхност. Ако този mIgM се свърже със собствени антигени в костния мозък, това води до клетъчна апоптоза, което води до делеция на клонинг. Някои незрели В клетки, разпознаващи собствени антигени, могат да променят специфичността на своя BCR чрез редактиране на рецептора. Незрелите В клетки започват да губят Tdt и CD10 експресията, но могат да експресират CD22, CD21 и FcR. Междувременно, нивата на експресия на CD19, CD20 и MHC II молекулите се увеличават.
4. Фоликуларни (FO) B клетки
Фоликуларните В клетки са основната подгрупа В клетки при мишки и хора. Малка подгрупа от Т2 преходни В клетки узрява във фоликуларни В клетки в костния мозък, но повечето незрели В клетки мигрират към далака, където узряват във фоликуларни В клетки или В клетки на маргиналната зона. Повечето миши и човешки фоликуларни В клетки експресират високи нива на IgD и CD23/FcεRⅡ, заедно с ниски нива на IgM. Освен това тези клетки експресират CD22/Siglec-2, а при мишки ниски нива на CD1d. В сравнение с В клетките на маргиналната зона при мишки и хора, фоликулните В клетки имат по-ниски нива на CD21. При активиране, фоликуларните В клетки се диференцират в краткотрайни плазмени клетки периферно или влизат в Т-клетъчно зависими реакции на зародишния център.
5. Маргинална зона (MZ) B клетка
При мишки В-клетките на маргиналната зона се намират в бялата пулпа на далака между маргиналния синус и червената пулпа, което им позволява бързо да реагират на пренасяни по кръвен път патогени, като същевременно участват както в Т-клетъчно-независимите, така и в Т-клетъчно-зависимите имунни отговори. Т2 преходните В клетки мигрират към далака и узряват или в В клетките на маргиналната зона, или във фоликулните В клетки. В клетките на човешката маргинална зона са циркулиращи клетки, открити не само в далака, но и на много други места. За разлика от фоликулните В клетки, В клетките на маргиналната зона експресират високи нива на IgM и ниски нива на IgD и CD23/FcεRⅡ. В допълнение, миши и човешки маргинални зонови В клетки експресират високи нива на CD1 (CD1d при мишки, CD1c при хора) и CD21.
6. В клетки на паметта
Активираните наивни В клетки се диференцират в В клетки на паметта в зародишни центрове, които могат бързо да се диференцират в плазмени клетки при повторно излагане на антиген.
В клетките на паметта на хора и мишки са хетерогенни популации. При мишки CD19, CD80, CD73 и PD-L2/CD273 обикновено се използват за идентифициране на В клетки на паметта. При хората В-клетките на паметта обикновено се идентифицират чрез експресията на CD27, заедно с ниски нива на CD23/FcεRⅡ и липсата на маркер за плазмени клетки Syndecan-1/CD138. DEP-1/CD148 също често се използва за идентифициране на B-клетки на човешката памет, както и високи нива на B7-1/CD80, B7-2/CD86 и CD95.
7. Плазмени клетки
Плазмените клетки са крайно диференцирани клетки, секретиращи антитела, които са от съществено значение както за незабавните, така и за дългосрочните отговори на антителата след излагане на антиген. Те са големи, непролиферативни клетки с минимална повърхностна имуноглобулинова експресия. Плазмените клетки отделят големи количества антитела и се считат за по-зрели от техните прекурсорни клетки, плазмени бласти. Краткоживеещите плазмени клетки обикновено се появяват в червената пулпа на далака веднага след инфекцията, докато дългоживеещите плазмени клетки се появяват седмици след излагане на антиген, често пребиваващи в специализирани ниши в костния мозък.
Миши и човешки плазмени клетки обикновено се идентифицират като CD19-Syndecan-1/CD138+ клетки. Човешки плазмени клетки също експресират високи нива на CD38, докато миши плазмени клетки експресират Ly6k, Sca-1/Ly6 и CD98, но не и B220/CD45R. Освен това както миши, така и човешки плазмени клетки не експресират IgD, показват ниски нива на МНС клас II молекули и високи нива на CD27, CXCR4, BCMA и транскрипционни фактори XBP1, IRF4 и BLIMP1.
▇ B Маркер за клетки
CD19:GB11061-1, GB12061, GB15006, GB15061
CD20:GB11540
CD22:GB115558
CD27:GB11583
CD30:GB111140
CD38:GB114831, GB114832
CD40:GB115671
CD45:GB113885, GB113886
CD74:GB115427, GB115175
CD138:GB115052
VPREB1 / CD179A:GB114476
IgM:GB112040
Забележка:Антителата на Servicebio могат да се използват само в научни изследвания.
1. CD19
котка №: GB11061-1, GB12061, GB15006, GB15061
CD19 служи като биомаркер за В-клетките, регулирайки тяхното развитие, пролиферация и диференциация чрез В-клетъчния рецептор (BCR) и медиирайки Т-клетъчната цитотоксичност срещу прицелните клетки. Има разлики в имунофенотипа на нормалните и злокачествените плазмени клетки. Проточната цитометрия обикновено показва, че нормалните плазмени клетки експресират CD19, докато злокачествените плазмени клетки, които са предимно CD19-отрицателни, показват отрицателен модел на оцветяване.
2. CD20
котка №: GB11540
CD20 е лимфоцитна повърхностна молекула, класически В-клетъчен маркер, експресиран от пре-В клетки до зрели В клетки и загубен в плазмени бласти и плазмени клетки. Той има молекулно тегло от 33 до 37 kDa и е кодиран от гена MS4A1, разположен на хромозома 11. Функционално се смята, че е калциев канал и регулира функцията на В-клетките чрез свързване с рецептора на В-клетките.
3. CD22
котка №: GB115558
CD22 се експресира предимно вътреклетъчно в ранното развитие на В-клетките, включително про-В и пре-В клетките, и когато В клетките узреят, тази експресия се измества към мембраната. Той е с най-висока експресия в зрелите В клетки и се експресира в повечето В-клетъчни злокачествени заболявания, включително остра лимфобластна левкемия (B-ALL), неходжкинов лимфом (NHL) и косматоклетъчна левкемия (HCL). По-конкретно, CD22 се експресира върху левкемични клетки при над 90% от ВСИЧКИ пациенти.
4. CD27
котка №: GB11583
При хората В-клетките на паметта обикновено се идентифицират чрез тяхната експресия на CD27.
5. CD30
котка №: GB111140
CD30 е член на суперсемейството рецептори на тумор некротизиращ фактор, предимно експресиран на повърхността на активирани Т клетки, В клетки и NK клетки, с ниски нива на експресия при нормални физиологични условия.
6. CD38
котка №: GB114831,GB114832
CD38 е прогностичен фактор за хронична B-клетъчна лимфоцитна левкемия (B-CLL). Заболяването с най-голям фокус върху CD38 е мултиплен миелом (ММ).
7. CD40
котка №: GB115671
CD40 е член на суперсемейството рецептори на тумор некротизиращ фактор, широко експресиран върху имунни клетки, особено В клетки, дендритни клетки (DC) и моноцити. Той играе решаваща роля в свързването на вродения и адаптивния имунитет.
8. CD45
котка №: GB113885,GB113886
CD45 е тип I трансмембранна протеин тирозин фосфатаза (PTPase), експресирана във всички хематопоетични стволови клетки (HSCs), с изключение на червените кръвни клетки и тромбоцитите.
9. CD74
котка №: GB115427,GB115175
CD74 се експресира във всички В клетки и определени подгрупи Т клетки (MHC II положителни), предимно в лимфоцитите на зародишния център. Използва се главно като маркер за В клетки и техните производни тумори. Изследванията показват, че CD74 е свързан с различни човешки заболявания, включително автоимунни заболявания (като системен лупус еритематозус), както и атеросклероза, болест на Алцхаймер и рак. В допълнение, CD74 е свръхекспресиран в множество тумори и е свързан с инвазия в ясноклетъчен бъбречноклетъчен карцином, рак на стомаха и рак на панкреаса.
10. CD138
котка №: GB115052
CD138 е специфичен маркер за плазмени клетки, известни също като ефекторни В клетки. Те възникват основно от антиген-активирани наивни В-клетки или В-клетки на паметта и са отговорни за синтезирането и съхраняването на антитела.
11. VPREB1 / CD179A
котка №: GB114476
Сурогатната лека верига, съставена от VPREB1 (CD179A) и lLAMBDA5 (CD179B) се експресира в пре-В клетки в непълна форма на имуноглобулин. При диференциране в незрели и зрели В клетки, CD179A/B се губят и се заместват от конвенционални леки вериги. Следователно CD179A/B може да служи като маркери за пре-В клетки.
12. IgM
котка №: GB112040
В клетките на маргиналната зона при мишки са разположени в бялата пулпа на далака между маргиналния синус и червената пулпа, докато при хората клетките на маргиналната зона са свободно рециркулиращи клетки, намиращи се не само в далака, но и на много други места. За разлика от фоликулните В клетки, В клетките на маргиналната зона експресират високи нива на IgM.
