Представяне на продукта
|
Име на продукта |
котка не |
спец. |
|
miRNA Първа Верига CDNA Синтез Kit (Опашка Реакция) |
G3334-25 |
25 реакции |
Описание на продукта/Въведение
Комплект за синтез на cDNA на първа верига на miRNA (реакция на хвост) съдържа всички реагенти, необходими за синтез на cDNA на първа верига на miRNA. Комплектът използва тотална РНК или миРНК като матрица, а поли(А) реакцията на полимераза и реакцията на обратна транскрипция се синхронизират, за да синтезират различни кДНК на първата верига на миРНК с висока ефективност. Комплектът също така осигурява U6 преден праймер и универсален обратен праймер за последваща амплификация (приложимо за проби от хора, плъхове и мишки), а синтезираният едноверижен кДНК продукт трябва да бъде проектиран само с преден PCR праймер за последваща PCR или qPCR.
Условия за съхранение и доставка
Кораб с мокър лед; Съхранявайте при -20 градуса, валидни 12 месеца.
Съдържание на продукта
|
Номер на компонента |
Компонент |
G3334-25 |
|
G3334-1 |
миРНК RT Ензим Микса |
25 μL |
|
G3334-2 |
5×реакционен буфер |
100 μL |
|
G3334-3 |
U6 Напред PCR Праймер (10 μM) |
100 μL |
|
G3334-4 |
Универсален обратен PCR праймер (10 μM) |
100 μL |
|
G3334-5 |
Вода без нуклеаза |
1 мл |
|
Наръчник |
Един екземпляр |
|
а: с РНКазен инхибитор и поли(А) полимераза.
b: с праймери за обратна транскрипция, dNTP смес, ATP и Mg²+.
Протокол / процедури за анализ
1. Препоръчителна подготовка на реакционната система (Препоръчителна подготовка на реакционната система върху лед)
|
Компонент |
Обем |
|
5×реакционен буфер |
4 μL |
|
miRNA RT ензимен микс |
1 μL |
|
Обща РНК/miRNAa |
x μL |
|
Вода без нуклеаза |
Добавете към 20 μL |
a: препоръчителната обща РНК е 2 ug (не повече от 5 ug), а препоръчителната miRNA е 200 ng.
2. Внимателно разбъркайте и центрофугирайте.
3. Извършете поли(А) полимеризация и обратна транскрипция, като използвате препоръчаните термични условия по-долу:
|
температура |
време |
|
37 градуса |
60 мин |
|
85 градуса |
5 сек |
4. Полученият сДНК реакционен разтвор се препоръчва за градиентно разреждане, преди да се използва като шаблон за последваща флуоресцентна количествена PCR.
Забележка
1. Бяха взети мерки за избягване на замърсяване с РНКаза по време на операцията.
2. Продуктите на обратната транскрипция могат да се съхраняват при -20 градуса за кратък период от време. Ако е необходимо дългосрочно съхранение, се препоръчва да се съхранява при -80 градуса след опаковането и да се избягват повтарящи се цикли на замразяване-размразяване.
3. Комплектът съдържа универсални праймери надолу по веригата за количествена PCR, а праймерите нагоре са миРНК-специфични праймери, проектирани според целевата миРНК и като цяло праймерите нагоре са целевите миРНК последователности, които променят U на Т.
Само за изследователска употреба!
Популярни тагове: mirna first strand cdna synthesis kit(tailing response), Китай mirna first strand cdna synthesis kit(tailing response) производители, доставчици, фабрика
